Estandarización de la citología vaginal exfoliativa correlacionando los niveles séricos de progesterona en perras durante la peri-ovulación.

Because accuracy of cytology as definitive test to determine the period of ovulation in canine females (dogs) it is controversial, it makes necessary to correlate typical characteristics of ovulation, as plasmatic levels of progesterone and cytogical changes to ensure optimus time of ovulation. Progesterone levels measures were carried out by ELISA test, to conclude if superficial cells percent found in vaginal cytology, is related with the hormonal levels during ovulation. Cytologic and serum samples of 30 healthy female dogs were collected every 48 hours. The datas were analysed by correlation test. When progesterone levels were below 10 ng/ml, the percentage of superficial cells was 72 +/- 1,72%, while the percentage of in flake, queratinizadas, intermediate cellular types were 13 +/- 3,12%, 84 +/- 1,14% and 16 +/- 2,62% respectively. When progestrone levels were between 10 to 20 ng/ml, the percentages of superficial cells was 68 +/- 2,08%, while in flake, queratinizadas, and intermediate cellular types were 11 +/- 3,19%, 80 +/- 1,9% and 21 +/- 3,63% respectively. Finally, within highest ranges (>20 ng/ml), the percentages of superficial cells was 57 +/- 3,52%, while in flake, queratinizadas and intermediate cells were 10 +/- 1,35%, 64+/- 2,75% and 35 +/- 3,31% respectively.Según la literatura, la exactitud de la citología como prueba definitiva para determinar el periodo de ovulación en hembras caninas es controversial; por tanto, se crea la necesidad de correlacionar una característica típica de la ovulación, como son los niveles plasmáticos de progesterona, con los cambios celulares detectados en la citología vaginal exfoliativa. La medición de progesterona en plasma se realizó por ensayo Inmunoabsorbente Ligado a Enzimas (ELISA), para verificar si el porcentaje de células superficiales encontradas en la citología vaginal se relaciona con los niveles hormonales en la ovulación. El trabajo se realizó en la Clínica Veterinaria Pequeños Animales, Dr. Santiago Reyes, de la ciudad de Bucaramanga. Se colectaron muestras citológicas y serológicas de 30 perras de diferentes razas y edades, y en buen estado de salud. Se les realizó la prueba citológica cada 48 horas para identificar los cambios morfológicos celulares, hasta considerar el inicio del diestro; luego, se realizó la medición de los valores séricos de progesterona en las perras en estro (por encima del 75% de células superficiales), cada 48 horas hasta el primer día del diestro. Los resultados encontrados fueron: en niveles inferiores a 10 ng/ml de progesterona sérica el porcentaje de células superficiales es del 72 +/- 1,72%; células en escama: 13 +/- 3,12%; el total de células queratinizadas: 84 +/- 1,14%; células intermedias: 16 +/- 2,62%. En niveles de 10 a 20 ng/ml de progesterona, los porcentajes de células encontradas en la citología vaginal exfoliativa fueron: células superficiales: 68 +/- 2,08%; células en escama: 11 +/- 3,19%; total de células queratinizadas: 80 +/- 1,9%; células intermedias: 21 +/- 3,63%. Finalmente, en niveles superiores a 20 ng/ml de progesterona sérica, los porcentajes de células encontradas en la citología vaginal exfoliativa: células superficiales: 57 +/- 3,52%; células en escama: 10 +/- 1,35%: total de células queratinizadas: 64 +/- 2,75%; y células intermedias: 35 +/- 3,31%

Evaluación de la eficiencia de la administración oral de progesterona en la sincronización del celo en cobayas

El presente estudio evaluó la eficiencia de la administración de progesterona oral (altrenogest) en dosis diferentes sobre la sincronización del celo en cobayas, con la finalidad de recuperar estructuras producidas en forma fisiológica entre los días dos y cuatro post-monta en estos animales. Se utilizaron 35 cobayas adultas multíparas entre 4-5 meses de edad de raza mestiza y 5 cobayos con más de 5 meses de edad con descendencia comprobada. Las cobayas se ubicaron en 5 grupos experimentales al azar y recibieron dosis diferentes de altrenogest desde el día cerohasta el día 15 del protocolo: T1=0,33mg/kg (n=7); T2=0,28mg/kg (n=7); T3=0,22mg/kg (n=7); T4=0,17mg/kg (n=7); T5=0,11mg/kg (n=7). A partir del día 16 se valoró la apertura de la membrana vaginal, obteniendo como resultados que 94,3% de cobayas respondieron a la administración de progesterona oral. Al analizar los resultados de las citologías se estableció que las cobayas del T1 presentaron un 50% de células superficiales anucleadas el día 1, los animales de T2 llegaron a ese porcentaje en el día 2 y los de T3, T4 y T5 en el día 3 post-retiro de la progesterona. Los resultados para determinar monta efectiva indican que los tratamientos 1 (1,86 ± 0,26 días) y 2 (2,17 ± 0,17 días) necesitaron similares días para la monta efectiva (P>0,05). Para el día de la ovulación se determinó que T1 presentó neutrófilos en porcentajes altos a partir del día 3 diferenciándose de los tratamientos 2, 3, 4 y 5 a partir de ese día. Sin embargo, los valores de neutrófilos en los tratamientos 2, 3, 4 y 5 al quinto día demuestra valores indicativos de que se produjo la ovulación. En dos de las 10 cobayas sacrificadas el día 4,5 post-monta se logró recuperar una estructura con dos embriones en estadio de mórula calidad 2. En conclusión, las dosis altas de progesterona oral son más efectiva en la sincronización del celo en cobayas, logrando obtener monta efectiva, ovulación a las 48 horas y recuperación de estructuras a los 4,5 días post-celo.The present study evaluated the efficiency of oral progesterone administration (altrenogest) at different doses on estrus synchronization in guinea pigs, with the purpose of recovering physiologically produced structures between days two and four post-assembly in these animals. Thirty-five adult multiparous guinea pigs between 4- 5 months of age of mixed breed and 5 guinea pigs older than 5 months of age with proven offspring were used. The guinea pigs were randomly placed in 5 experimental groups and received different doses of altrenogest from day zero to day 15 of the protocol: T1=0.33mg/kg (n=7); T2=0.28mg/kg (n=7); T3=0.22mg/kg (n=7); T4=0.17mg/kg (n=7); T5=0.11mg/kg (n=7). From day 16 onwards, the opening of the vaginal membrane was evaluated, obtaining as results that 94.3% of guinea pigs responded to the administration of oral progesterone. When analyzing the cytology results, it was established that T1 guinea pigs presented 50% of anucleated surface cells on day 1, T2 animals reached this percentage on day 2 and T3, T4 and T5 animals on day 3 post progesterone withdrawal. Results for determining effective mating indicate that treatments 1 (1.86 ± 0.26 days) and 2 (2.17 ± 0.17 days) required similar days for effective mating (P>0.05). For the day of ovulation, it was determined that T1 presented neutrophils in high percentages from day 3 onwards, differentiating from treatments 2, 3, 4 and 5 from that day onwards. However, the neutrophil values in treatments 2, 3, 4 and 5 on the fifth day showed values indicative of ovulation. In two of the 10 guinea pigs sacrificed on day 4.5 postassembly, a structure with two quality 2 morula stage embryos was recovered. In conclusion, high doses of oral progesterone are more effective in synchronizing estrus in guinea pigs, obtaining effective mating, ovulation at 48 hours and recovery of structures at 4.5 days post-estrus.Médico Veterinario ZootecnistaCuenc

Características ováricas y hormonales de la cobaya en diferentes etapas del ciclo estral

La presente investigación tuvo como objetivo, evaluar las características ováricas y hormonales de la cobaya post-sincronización de celo con progesterona oral. El estudio se realizó en el laboratorio de Biotecnología de la Facultad de Ciencias Agropecuarias de la Universidad de Cuenca. Se emplearon 43 cobayas entre 4 y 5 meses de edad, con un peso promedio de 886,2 ± 12,80 gramos, fueron sincronizadas durante 15 días con progesterona (P4) oral (Altrenogest) para la posterior valoración de la membrana vaginal, citología, toma de muestras sanguíneas, evaluación de la morfología ovárica, recuento de folículos antrales y cuerpo lúteo, así como la clasificación de COC’s obtenidos en cinco momentos del ciclo estral (día 15, 1, 4, 8 y 11). Los resultados demostraron que la administración oral de P4 en dosis de 0,22 mg/kg de peso vivo durante 15 días permitió que el 94,1% de cobayas presentaran apertura de membrana vaginal (AMV). Se determinó una media de 30,1 folículos antrales de diferentes tamaños disponibles para aspiración, es decir 15,1 folículos/ovario. Recolectándose 1249 COC’s aptos mediante la técnica de aspiración folicular, de los cuales 61,5% provinieron de folículos entre (0,5-1 mm), 60% (menores a 0,5 mm) y 71,4% (mayores a 1 mm). En conclusión, se ratifica que la dinámica folicular en la cobaya es bifásica, además, el cuerpo lúteo tiene fase de crecimiento, estática y regresión y que el folículo preovulatorio llega a medir entre 0,5 a 1 mm y que esta clase de folículos son los que proporcionan COC ́s de mayor calidad.The objective of this research was to evaluate the ovarian and hormonal characteristics of the guinea pig after heat synchronization with oral progesterone. The study was carried out in the Biotechnology laboratory of the Faculty of Agricultural Sciences of the University of Cuenca. Forty-three guinea pigs between 4 and 5 months of age were used, with an average weight of 886,2 ± 12,80 grams, they were synchronized for 15 days with oral progesterone (P4) (Altrenogest) for the subsequent assessment of the vaginal membrane, cytology, blood sampling, evaluation of ovarian morphology, antral follicle count and corpus luteum, as well as the classification of COC's obtained at five moments of the estrous cycle day (15, 1, 4, 8 and 11). The results showed that the oral administration of P4 at a dose of 0.22 mg/kg of body weight for 15 days allowed 94.1% of guinea pigs to present vaginal membrane opening (AMV). A mean of 30.1 antral follicles of different sizes available for aspiration was determined, that is, 15.1 follicles/ovary. Collecting 1,249 suitable COC's through the follicular aspiration technique, of which 61.5% come from follicles between (0.5-1 mm), 60% (less than 0.5 mm) and 71.4% (greater than 1 mm). In conclusion, it is confirmed that the follicular dynamics in the guinea pig is biphasic, in addition, the corpus luteum has a growth, static and regression phase and that the preovulatory follicle measures between 0.5-1 mm and that this class of follicles are the ones that provide COC's of the highest quality.0000-0001-6543-759